Василиса Романовна Михайлова

(4-8 сезоны) Следователь. Имела звание лейтенанта, а с 65 серии 7 сезона ("Третья звёздочка") — старшего лейтенанта. Заняла место Лены Брусникиной, улетевшей к своему возлюбленному Артёму. Знает французский, так как изучала его в школе, там же занималась игрой на фортепьяно. Имеет крестницу Машу, чьи родители долгое время проводят за границей и оставляют свою дочь на Василису. Василиса прирождённый начальник, умело управляется в отделе, умеет организовать своих друзей. Испытывает романтические чувства к Максиму, очень за него переживает. В серии "Оригами" у них начинается роман. Василиса пришла в сериал в 24 серии 4 сезона ("Расставание"). В начале 9 сезона ее повышают и переводят работать в Санкт-Петербург. В роли Василисы Михайловой — Наталья Юнникова.

Екатерина Васильевна Калитина

(9 сезон) Опытный следователь, пришла на место Василисы в 9 сезоне. Имеет звание капитана. В роли Екатерины Калитиной - Светлана Брюханова.

Анатолий Иванович Щепкин

(1-4 сезоны) Оперуполномоченный. Имел звание старшего лейтенанта, а с 51 серии 4 сезона ("Курочка Ряба") — капитана. В детстве имел моторную алалию (отсутствие речи при сохранном понимании), до четвёртого класса учился в школе для глухонемых детей, как следствие владеет языком жестов. Эмоционален, всегда говорит то, что думает, однако это не мешает ему быть любимцем отдела. Любит пошутить, поспорить, часто ворчит. Бывает недоволен решениями начальства, считая, что большинство неприятных и тяжёлых заданий несправедливо выпадают на его долю. Любит тяжёлый рок. Есть жена Людмила и сын Даня. В роли Анатолия Щепкина — Виктор Низовой.

Алексей Валерьевич Самойлов

(3-9 сезоны) Оперуполномоченный. Имел звание старшего лейтенанта, а с 75 серии седьмого сезона ("Путёвка для бабушки") — капитана. Серьёзный оперативник. Появлялся в некоторых сериях 3-го и 4-го сезонов, а в 70 серии 4 сезона уже полностью заменил Толика. Разговорчив, упорен и ворчлив. Любит шутить и давать советы (после работы). Но когда дело касается работы (рабочего дня) всегда очень суров, серьёзен. Хобби — рыбалка, бег и футбол. Есть жена Ольга и сын Никита. Крылатые фразы: «Ёжкин кот», « Вот тебе, бабушка, и Юрьев день!», «Ей-Богу», «Дружище», «Интересно девки пляшут», «Братцы-кролики», «Вот такая петрушка» и «Старичок». В роли Алексея Самойлова — Алексей Моисеев.

Жанетта Петровна Сельская

(1-9 сезоны) Cудмедэксперт, патологоанатом. Имеет звание майора. Образование высшее медицинское. Немного странная, разговорчивая, обожает сплетничать. Остра на язык. Старается быть оптимисткой, почти никогда не впадает в уныние. Была один раз замужем. Влюблена в Садовского и вышла за него замуж в начале восьмого сезона. В роли Жанетты Сельской — Оксана Сташенко.

Станислав Дмитриевич Ильковский

(1 сезон) Эксперт-криминалист. Имеет звание майора. В конце 1-го сезона уехал в заграничную командировку. В роли Станислава Ильковского — Александр Коршунов.

Иннокентий Степанович Садовский

(2-9 сезоны) Высококлассный эксперт-криминалист. Имеет звание майора. Застенчивый, неуклюжий молодой человек. Немного скован и стеснителен, часто обидчив и молчалив. В детстве мечтал поступить в мореходное училище, но не прошёл медкомиссию по зрению. Увлекается моделированием парусников и шахматами. Пришёл на смену Ильковскому, уехавшему работать за границу. Был неравнодушен к своей коллеге Жанетте Петровне Сельской, однако редко выставлял свои чувства напоказ. В начале восьмого сезона женился на ней. В роли Иннокентия Садовского — Константин Костышин.