Доктор Пенелопа Янг — психиатр клиники Аркхэм, которая очень сильно сосредоточена в своей работе. Именно она преобразовала «Веном» Бэйна в «Титан», и потом была обманута Джокером. В ходе игры погибнет от бомбы главного злодея. Персонажа озвучила Кри Саммер. Актёр озвучения в российской версии — Елена Кищик.

Куинси Шарп — старший надзиратель лечебницы Аркхэм. Лечением суперзлодеев занимается лишь для своих политических стремлений. Крайне консервативен и серьёзен, в то же время крайне труслив. В ходе игры будет в плену у Харли Квинн, при спасении передаст Бэтмену образец для своей визитной карточки, чтобы тот мог взламывать систему безопасности лечебницы. Если собрать все послания призрака Амадея Аркхэма, то можно узнать о том, что мистер Шарп смог расшифровать их до Бэтмена. После этого он начал страдать раздвоением личности. Его вторая личность — Амадей Аркхэм. Актёр озвучания в англоязычной версии — Том Кэйн, в российской версии — Валерий Сторожик.

Ядовитый Плющ — суперзлодейка, способная управлять растениями. Будет освобождена из камеры её подругой Харли Квинн. Бэтмен должен выпытать у неё расположение растения, которое сможет подавить эффекты мутагена «Титан». Потом она полностью заполнит весь остров Аркхэм смертоносными растениями, позже герой будет вынужден с ней сразится. Настоящее имя — Памела Лилиан Айсли. Способна выделять феромон для контроля над разумом жертвы, также яд способный убить человека. Из её аудиозаписей можно узнать о том, как она соблазняла и убила нескольких её докторов.

В английскоязычной версии злодейку озвучила Тася Валенца. В российской версии — Елена Ивасишина.

Пугало — суперзлодей, постоянно мешающий Бэтмену. В ходе игры несколько раз отравит его своим галлюциногеном, заставляя погрузится в царство собственных кошмаров. После третьего столкновения, попытается отравить канализацию Готэма, но неожиданно будет схвачен Кроком, который не хотел, чтобы кто-то другой, кроме него, смог убить Бэтмена. Настоящее имя — Джонатан Крейн, доктор, психиатр. Прекрасно разбираясь в страхах и фобиях людей, создал галлюциноген «Фобос», сводящего людей с ума их же страхами. Носит костюм пугала для усиления влияния на психику жертвы; костюм включает в себя противогаз и шприцы, надетые на пальцы правой руки, для подкожных инъекций токсина «Фобоса». По иронии судьбы, собственная фобия Крейна — страх перед летучими мышами. В его аудиозаписях он мучает доктора Мерфи, даже в неволе пытаясь продолжать свои исследования, в дальнейшем можно узнать о его отношении с персоналом клиники. Также в аудиозаписях ведёт себя так, как будто он сам врач, издеваясь над докторами, которых называет «больными». После титров может быть показан ролик, где он сбегает, прихватив с собой канистру «Титана». В оригинальной версии персонажа озвучил Дино Андраде, в русской версии — Борис Репетур.

Бэйн — суперзлодей, который тайно был перевезён из Блэкгэйта в Аркхэм, для того, чтобы изъять для исследований его «Веном». В ходе игры Джокер освободит его и вернёт обратно «Веном», чтобы Бэйн прикончил Бэтмена. Позже он будет побеждён героем, который пожертвует для этого Бэтмобилем. Настоящее имя — неизвестно. Под воздействием суперстероида «Веном» становится невероятно силен и вынослив, в то же время он крайне умен и целеустремлён. После титров может быть показан ролик, где он сбегает, прихватив с собой канистру «Титана». В оригинальной версии игры персонажа озвучил Фред Татасиор, в русской версии — Борис Репетур.